退火温度一般是多少？

唉，这种题就是中国特色，完全理论脱离实际。pcr退火温度是一个范围，一般是50度到65度，或者到70度做两步法pcr。其中，模板的gc含量、模板的组成（单一模板还是cdna还是全基因组dna还是别的什么）等等条件都会影响tm值。没有一个确定的说是多少比较好，都是具体情况具体分析。有的时候引物设计回来，还要做温度梯度测验，设计的tm不一定就是最适合的tm。不得不说这题直接问一个数，纯属是闭门造车...